Российский журнал

ISSN 0042-8809

Главное меню  ׀  Редакционная коллегия ׀  Международный редакционный совет  ׀  Основные направления ׀   Содержания и рефераты  ׀  Правила для авторов ׀  Подписка

Выпуск:
Том 53, Выпуск 4

Название: ИДЕНТИФИКАЦИЯ ЦИТОХРОМОВ Р450 МИКРОСОМ КЛЕТОК ПЕЧЕНИ ЧЕЛОВЕКА С ПОМОЩЬЮ МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ.

Авторы: Н.А. Петушкова¹*, А.В. Лисица¹, И.И. Карузина¹, В.Г. Згода¹, Г.Ф. Шереметьева², Н.Ф. Саменкова¹, И.П. Никитин¹, Т.А. Сахарова¹, А.Т. Копылов¹, А.И. Арчаков¹.

Адрес:

1. ГУ НИИ биомедицинской химии РАМН, 119121 Москва, ул. Погодинская, д. 10; тел: (495) 247-3960; факс: (495) 245-0857;

эл. почта: Natalia.Petushkova@ibmc.msk.ru

2. Российский научный центр хирургии РАМН, 119992 Москва, Абрикосовский переулок, д.2

 Реферат:

Для выявления и идентификации форм цитохрома Р450 высокоочищенных мембран микросом печени человека были использованы методы протеомного анализа, которые включали разделение белков с помощью одномерного и двумерного электрофореза (1D и 2D) и молекулярное сканирование методом масс-спектрометрии участка геля в диапазоне 45-66 кДа (область, соответствующая молекулярной массе цитохромов Р450). Анализ содержания белков проводили по оригинальной технологии 1D-ZOOMER, которая позволяла осуществлять обработку массива   масс-спектров, а не единичных масс-спектров, как принято в стандартных методиках. В области  45-66 кДа было идентифицировано 13 микросомальных мембранных белков, в том числе такие формы цитохрома Р450, как 1А2, 1В1, 2А6, 2Е1, 2C8, 2С9, 2С10, 2D6, 3А4, 4A11, 4F2. Исследование ферментной активности цитохромов Р450 семейств 1А, 2В, 2С, 3А и 2Е в микросомах клеток печени человека выявило снижение скоростей О-деалкилирования и         N-деметилирования цитохромов Р450 1А1/1А2 и 3А4 при патологии, в то время как активности      7-бензоксирезоруфин-О-дебензилазы (характеризует суммарную активность CYP2B и CYP2C), цитохрома Р450 2Е1 (окисление метанола), 7-пентоксирезоруфин-О-деалкилазы (CYP 2B),  7-этокси- и 7-метоксикумарин-О-деалкилаз (CYP 2B1) практически не изменялись. На основании полученных результатов показана эффективность использования комбинации протеомного и биохимического анализов для инвентаризации цитохромов Р450 и выявления уровня их экспрессии, обсуждаются возможности масс-спектрометрии для количественной оценки белков.

Ключевые слова: микросомы, печень, цитохромы Р450, микросомальное окисление, одномерный (1D) и двумерный (2D) электрофорез, масс-спектрометрия.

[Back]